Il metodo per preparare il terreno in polvere secca in liquido è più o meno lo stesso e i passaggi generali sono i seguenti:
Preparare i materiali:
Assicurati di avere abbastanza acqua pura per colture cellulari o iniettabili, nonché gli additivi necessari come una soluzione di bicarbonato di sodio al 7,5%, una soluzione di L-glutammina 200 mM, una soluzione di acido cloridrico 1N e una soluzione di idrossido di sodio 1N.
Polvere secca disciolta:
Versare il terreno in polvere secca in un contenitore.
Utilizzare una quantità adeguata di acqua (solitamente acqua pura per coltura cellulare o per iniezione) per sciogliere completamente la polvere secca.
Assicurarsi che la quantità totale di acqua sia pari a 2/3 della quantità totale di mezzo liquido richiesto.
Regolare il valore del pH:
Utilizzare un pHmetro o una striscia reattiva di precisione per pH per regolare il pH del mezzo al livello desiderato, solitamente 7,2-7,4.
Aggiungi additivi:
Secondo le istruzioni del prodotto e i requisiti sperimentali, aggiungere una quantità adeguata di bicarbonato di sodio, L-glutammina e altri additivi.
Filtrazione per la rimozione dei batteri:
La membrana filtrante microporosa da 0,22um è stata utilizzata per filtrare e rimuovere i batteri per garantire la sterilità del mezzo.
Salva:
Il terreno liquido preparato è stato conservato al riparo dalla luce a 2℃ ~ 8℃.
.
Notare che:
1. La proporzione specifica e le fasi di preparazione possono variare a seconda delle diverse marche e tipi di terreni in polvere secca, pertanto le istruzioni sulla confezione dei terreni devono essere lette attentamente prima dell'uso.
2. Il test sterile deve essere effettuato dopo la preparazione del terreno di coltura per rilevare se è presente contaminazione nel terreno di coltura.
3. La quantità di liquido preparato in ciascun lotto deve essere utilizzata per circa 2 settimane, in modo da evitare la perdita di nutrienti causata da un tempo troppo lungo.